高效液相色譜是20世紀(jì)70年代迅速發(fā)展起來的一種高效、快速的分析分離技術(shù),是現(xiàn)代分離檢測的重要手段。
色譜的分離原理是當(dāng)溶解在流動相中的組分通過固定相時(shí),與固定相的相互作用(吸附、分布、排斥、親和力)的大小和強(qiáng)度不同,在固定相中的保留時(shí)間也不同,因此從固定相相繼流出。也叫色譜法,色譜法。
高效液相色譜儀
高效液相色譜法(HPLC)是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上不斷發(fā)展結(jié)合起來的,其以液體可以作為企業(yè)流動相,并采用不同顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜進(jìn)行分離控制技術(shù)。其分離管理機(jī)制與常規(guī)柱色譜條件相同,但填料更加需要精細(xì),需高壓泵推動,柱效高,分析處理速度快。
與氣相色譜法不同的是,液相色譜中的流動相還涉及組分的分離過程,其組成、比例和 pH 值可以靈活調(diào)節(jié),分離方式也多種多樣。在實(shí)際操作中,可以通過改變流動相的組成來調(diào)節(jié)色譜柱上樣品的保留值和選擇性,從而實(shí)現(xiàn)不同樣品的分離。
高效液相色譜應(yīng)用廣泛,不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。幾乎所有的化合物包括高沸點(diǎn)、極性、離子化合物和大分子物質(zhì)都可以用HPLC進(jìn)行分析測定,從而彌補(bǔ)了氣相色譜的不足。在已知的有機(jī)化合物中,大約20%可以用氣相色譜分析,而80%需要用高效液相色譜分析。